Técnica de Reacción de Cadena de la Polimerasa (PCR) para la detección de Neumococo

La PCR para la detección de neumococo es una técnica molecular que permite identificar el ADN de la bacteria Streptococcus pneumoniae, causante de la neumonía neumocócica, en muestras respiratorias o de sangre; este examen se enfoca en detectar genes como la autolisina A (LytA), neumolisina (PLY) y el Spn9802. Actualmente la PCR se enfoca en el gen LytA (encargado de la liberación de productos bacterianos proinflamatorios). Esta técnica resulta efectiva en muestras extraídas por métodos invasivos como el LCR, líquido pleural y aspirados de pulmón.

Detección de ADN neumocócico en muestras de líquido pleural utilizando la reacción en cadena de la polimerasa

TEMA: Detección de ADN neumocócico de Streptococcus pneumoniae en muestras de líquido pleural utilizando la reacción en cadena de la polimerasa.

OBJETIVO: Investigar el rendimiento de la PCR en muestras de líquido pleural para el diagnóstico de neumonía neumocócica.
MUESTRA: Líquido pleural ; extracción: usando el mini kit QIAamp DNA blood 
TIPO DE ÁCIDO NUCLÉICO: ADN genómico (ADN neumocócico)
GENES A ANALIZAR: Gen de la autolisina A (LytA)

TAMAÑO EN PARES DE BASES: 927 pb
TIPO DE PCR: PCR cuantitativa en tiempo real

PASOS

• DESNATURALIZACIÓN: 94 °C durante 5 minutos, luego 35 ciclos de desnaturalización a 94 °C durante 30 segundos
• HIBRIDACIÓN: 68 °C durante 30 segundos
• ELONGACIÓN: 72 °C durante 2 minutos

ELECTROFORESIS O VISUALIZACIÓN: 

Imagen tomada de: Méndez-Álvarez S, Pérez-Roth E. La PCR múltiple en microbiología clínica. Enferm Infecc Microbiol Clin [Internet]. 2004 [citado el 17 de diciembre de 2023];22(3):183–92. Disponible en: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-la-pcr-multiple-microbiologia-clinica-13058027

Referencias bibliográficas: 

1. Sanz JC, Ríos E, Rodríguez-Avial I, Ramos B, Marín M, Cercenado E. Identification of Streptococcus pneumoniae lytA , plyA and psaA genes in pleural fluid by multiplex real-time PCR. Enferm Infecc Microbiol Clin [Internet]. 2018 [citado el 15 de diciembre de 2023];36(7):428–30. Disponible en: https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-identification-streptococcus-pneumoniae-lyta-plya-S0213005X17302173